
亚细胞分级分离
对于大多数研究来说,只需直接制备全细胞裂解物以获取可溶蛋白样品,用于下游直接检测或进一步纯化与分离。但是,如果在蛋白提取之前将细胞分为不同的区室或细胞器,可以显著提高特定蛋白的产量或富集率?;盗呀馔ǔ;崞苹邓邢赴?,使分离特定细胞组分变得更加困难。但是,通过谨慎优化试剂,已开发出基于逐级差异去垢剂的方法来分离核蛋白、胞质蛋白和膜蛋白组分。该方法可以将疏水性膜蛋白溶解,使其与亲水蛋白分离,并且可以分离完整细胞核、线粒体和其他细胞器,用于直接研究或分步提取蛋白。
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