细胞LDH漏出率(释放)检测试剂盒(比色)

BB-48602
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产品概述 product description

贝博?BBcellProbe?LDH乳酸脱氢酶漏出率检测试剂盒(BB-48602)是利用LDH催化乳酸生成丙酮酸和NADH,NADH通过电子载体将显色剂还原生成橙黄色物质,在490nm处的OD值与LDH成正比,利用此原理可以测定死细胞和受损细胞的LDH漏出情况。

LDH (乳酸脱氢酶) 是存在于细胞质的一种酶,当细胞膜受到损伤时,LDH会释放到培养基中。由于释放出的LDH稳定,检测培养基中LDH的量可以作为测定死细胞和受损细胞数量的指标。

保存温度
2-8℃避光
有效期
一年
检测方法
1.酶标仪 2.分光光度计
适用样本
1.悬浮细胞 2.贴壁细胞
产品应用
●评价培养细胞损伤程度的大小
●评估药物治疗作用的好坏
●用于药物的筛选
仪器准备
1. 酶标仪/分光光度计
2. 离心机
3. 移液器
4. 冰箱
5. 冰盒
试剂准备
1. PBS缓冲液或者HBSS
耗材准备
1. 离心管
2. 吸头
3. 一次性手套
4. 96孔板
使用注意事项
1.LDH反应液短期存放于2-8℃C,长期存放请分装后-20°C避光保存。
2.避免反复冻融。
3.冻存后溶解时注意重新混匀。
4.一定要用无血清培养液培养细胞,以排除血清的干扰,否则实验结果偏大。
5.尽可能现取现测,如果收集的细胞培养液放置时间较长,LDH的活性就会下降,所测数据偏
小。
使用方法
试剂配制:
将LDH抽提液A与无血清培养基按1:9比例混合(例如:1ml试剂A加入9ml不含血清的培养基),充分混匀,即成LDH抽提液工作液A。

将LDH反应液B1与LDH反应液B2按1:1比例混合(例如:1ml试剂B1加入1ml试剂B2),充分混匀,即成LDH反应液工作液B。

LDH抽提:
1将所需检测的细胞样品孔中的培养基吸入一块新的96孔培养板 II。
2.在留下细胞的原培养板 I 中加入100μlLDH抽提液工作液。
3.将加入了LDH抽提液工作液的培养板【室温轻轻振荡30-45分钟。

更多详情请查阅试剂盒里的纸质说明书。